امروز جمعه ۱۷ فروردین ۱۴۰۳ ساعت ۱۲
شناسایی گلیکوزید های قلبی
۱. استخراج گلیکوزید های قلبی
۲. شناسایی گلیکوزید های قلبی دسته کاردنولیدها با روش شیمیایی
۲. شناسایی گلیکوزید های قلبی دسته کاردنولیدها با روش شیمیایی
۲. شناسایی گلیکوزید های قلبی دسته کاردنولیدها با روش شیمیایی
۱. استخراج گلیکوزید های قلبی
یک گرم پودر گیاه را با ۱۰ میلی لیتر از محلولی که شامل اتانول و آب (۷:۳) می باشد مخلوط کرده و برای ۵ دقیقه رفلاکس می کنیم. پس از سرد شدن آن را صاف کرده و به حاصل مقدار ۳۰ میلی لیتر آب و ۱۵ میلی لیتر محلول استات سرب ۱۵ درصد اضافه و خوب مخلوط می نماییم. (در مورد محلول های هیدروالکلی این عمل را با اضافه کردن آب و محلول استات سرب ادامه می دهیم) حاصل به دست آمده را برای مدت ۵ دقیقه در دمای آزمایشگاه نگه داشته و بعد از صاف کردن حاصل صافی را به دکانتور منتقل می کنیم. محلول را ۳ مرتبه و هر بار با ۱۰ میلی لیتر محلولی که شامل کلروفرم و ایزوپروپانول (۳:۲) می باشد دکانته می کنیم. فاز های آلی را با یکدیگر مخلوط کرده و توسط سولفات سدیم بدون آب، آب گیری کرده و برای آزمایش های بعدی به ۳ قسمت تقسیم می کنیم.
۲. شناسایی گلیکوزید های قلبی دسته کاردنولیدها با روش شیمیایی
الف) واکنش بالجت (Baljet-Reaction) :
قسمت اول محلول تهیه شده را تغلیظ می نماییم. باقی مانده را در ۳ میلی لیتر متانول حل کرده و به آن ۳ میلی لیتر معرف بالجت اضافه و خوب مخلوط می کنیم. برای بهتر مشاهده کردن آزمایش، نمونه ای از ۳ میلی لیتر متانول و ۳ میلی لیتر معرف بالجت تهیه نموده و مورد مقایسه قرار می دهیم. با توجه به وجود گلیکوزید های قلبی گروه کاردنولید ها رنگ محلول مورد آزمایش نارنجی می شود. این رنگ برای چند ساعت پایدار است. – تهیه معرف بالجت: ۹/۵ میلی لیتر از محلول یک درصد اسید پیکریک و ۰/۵ میلی لیتر از محلول سود ۱۰ درصد را با یکدیگر مخلوط کرده و مورد استفاده قرار می دهیم. (این معرف بایستی همیشه تازه تهیه شود)
۲. شناسایی گلیکوزید های قلبی دسته کاردنولیدها با روش شیمیایی
ب) واکنش کد(Kedde-Reaction) :
قسمت دوم محلول تهیه شده را کاملا تغلیظ می کنیم و به باقی مانده، ۲ میلی لیتر از محلول ۲ درصد ۳،۵-دی نیتروبنزوئیک اسید در متانول اضافه و خوب مخلوط می کنیم. سپس ۲ میلی لیتر از محلول پتاس یک نرمال به آن اضافه می کنیم. با توجه به وجود گلیکوزید های قلبی گروه کاردنولید ها رنگ ارغوانی ایجاد می شود که بسیار ناپایدار بوده و رنگ خود را سریع از دست می دهد.این آزمایش را می توانیم با کاشتن چند قطره محلول مورد آزمایش بر روی یک فیلتر کاغذی و با استفاده از معرف کد و محلول پتاس انجام دهیم. ایجاد حلقه ارغوانی در اطراف لکه بعد از پاشیدن معرف نشانگر وجود این ترکیبات است.
۲. شناسایی گلیکوزید های قلبی دسته کاردنولیدها با روش شیمیایی
ج) واکنش گزانتیدرول (Xanthydrol-Reaction)
قسمت سوم محلول نمونه مورد آزمایش را کاملا تغلیظ نموده و به باقی مانده ۳ میلی لیتر از محلول ۰/۰۱ درصد گزانتیدول در استیک اسید اضافه کرده و بعد از آن یک قطره اسید کلریدریک غلیظ اضافه می کنیم. محلول زرد بدست آمده را برای مدت ۳ دقیقه در بن ماری حرارت می دهیم. ایجاد رنگ قرمز وجود قند های دس اوکسی را در محلول نشان می دهد.

