امروز جمعه ۱۷ فروردین ۱۴۰۳ ساعت ۱۲
استخراج و شناسایی اسانس ها و ترکیبات آن ها
۱. استخراج اسانس بابونه توسط دستگاه اسانس گیری
نام علمی گیاه بابونه: Matricaria chamomilla
۲۵ گرم از گل های بابونه را در یک بالن ۵۰۰ میلی لیتری ریخته و به آن ۲۵۰ میلی لیتر آب (یا محلول ۱ درصد کلرو سدیم) اضافه نموده و با استفاده از دستگاه اسانس گیری و هیتر برای مدت ۲ ساعت عمل اسانس گیری را انجام می دهیم. اسانس استخراج شده را از دستگاه جدا نموده و تعیین مقدار می کنیم. برای تعیین مقدار اسانس به دست آمده از روش های حجمی و وزنی استفاده می شود. (قابل توجه است که روس استفاده از دستگاه اسانس گیری و تعیین مقدار اسانس بدست آمده در آزمایشگاه شرح داده می شود) اسانس تهیه شده را در ۱ میلی لیتر تولوئن حل کرده و جهت آزمایش TLC آماده می کنیم.
۲. استخراج ترکیبات اسانس بابونه به روش عصاره گیری
برای تهیه عصاره مقدار ۱ تا ۲ گرم از گل های بابونه را با ۱۰ میلی لیتر دی کلرومتان برای مدت نیم ساعت توسط دستگاه تکان دهنده عصاره گیری کرده و سپس آن را از طریق فیلتر کاغذی صاف کرده و حاصل صافی را در دمای ۴۰ درجه سانتی گراد کاملا تغلیظ می کنیم. حاصل خشک شده را در یک میلی لیتر تولوئن حل کرده و جهت آزمایش TLC آماده می کنیم.
۳. شناسایی ترکیبات موجود در اسانس و عصاره گل های بابونه به روش TLC
برای شناسایی ترکیبات اسانس گل های بابونه در عصاره دی کلرومتانی از شرایط کروماتوگرافی زیر استفاده می شود:
- فاز ثابت: سیلیکاژل GF254 به ضخامت ۰٫۲۵ میلی متر
- فاز متحرک: (۹۳:۷)Chloroform-EtAc
برای شناسایی ترکیبات استخراج شده اسانس بابونه از شرایط کروماتوگرافی زیر استفاده می شود:
- فاز ثابت: سیلیکاژل GF254 به ضخامت ۰٫۲۵ میلی متر
- فاز متحرک: (۹۳:۷)Toluol-EtAc
از عصاره و اسانس تهیه شده به مقدار ۱۰ تا ۲۰ میکرولیتر به صورت خطی به طور جداگانه بر روی صفحه TLC کاشته و پس از آن در تانک کروماتوگرافی با سیستم حلال مربوطه قرار داده و بعد از صعود ۱۵ سانتی متر از حلال صفحه را از تانک بیرون می آوریم. آن را در هوای آزمایشگاه خشک کرده و برای آشکار سازی ترکیبات اسانس ها از معرف وانیلین – اسید سولفوریک (یا آنیس آلدئید – اسید سولفوریک) استفاده می شود. ابتدا حدود ۱۰ میلی لیتر از محلول ۵ درصد سولفوریک اسید در اتانول را روی صفحه پاشیده و بلافاصله حدود ۵ تا ۱۰ میلی لیتر محلول ۱ درصد وانیلین در اتانول را روی صفحه اسپرس می کنیم. بعد از آن صفحه را برای مدت ۵ تا ۱۰ دقیقه در حرارت ۱۱۰ درجه سانتی گراد در اتو قرار داده تا لکه ها ظاهر گردند. با توجه به رنگ لکه ها و Rf آن ها با منابع مورد شناسایی قرار داده و گزارش می دهیم.

